Innehåll
- Bättre visning
- Identifiering och klassificering
- Genomförbarhetsdetektering
- Identifiering av cellulära strukturer
Mikrobiologer studerar egenskaperna hos mikroorganismer, såsom alger, bakterier, protozoer, svampar och virus, med hjälp av ett mikroskop. Även om vissa organismer, såsom protozoer och jästceller, är lätta att se genom objektglas, behöver bakterieceller färgas. Forskare har utvecklat flera metoder, såsom Gram-färgningsteknik, syrabeständig färgning och fluorescerande färgning för att förbättra visualiseringen av bakterieceller och cellstrukturer. Med sådana färgningsmetoder är det möjligt att identifiera de strukturella egenskaper som hjälper till att klassificera bakterier.
Bättre visning
Bakterieorganismer är så små att de flesta är synliga endast under mikroskopet med en förstoringskraft på 1000 gånger. Den enkla ökningen i storlek ger emellertid inte en tillräcklig grad av klarhet, så bakterierna måste därför färgas före observation för att ge den tydlighet som är nödvändig för visualisering.
Identifiering och klassificering
Färgningsbakterier för att skilja mellan typer av bakterier kallas differentiell färgning. Gramfläck är en differentiell fläck som skiljer bakterier beroende på cellväggens innehåll. I denna metod reagerar bakteriecellerna med en kristallviolett färg för att bli violett. Genom tillsats av ett blekmedel förlorar vissa bakterieceller sin färg, medan andra inte gör det. Genom tillsats av safraninfärgningsmedel blir missfärgade celler röda, medan bakterieceller som inte tappar färg förblir violetta. Celler som blir röda kallas gramnegativa organismer och celler som inte blir röda klassificeras som grampositiva organismer. Gram-färgningstekniken ger en snabb metod för initial identifiering av bakterier som är involverade i infektioner. På samma sätt hjälper den syrabeständiga färgningsprocessen till att specifikt identifiera organismer som tillhör den klass av bakterier som kallas mykobakterier, såsom Mycobacterium tuberculosis.
Genomförbarhetsdetektering
I prover av bakteriekulturer är det ofta viktigt att detektera närvaron av levande bakterieceller. Metoder som fluorescerande färgning hjälper till att identifiera om odlingsceller är livskraftiga eller inte. Levande bakterier har förmågan att omvandla tetrazolium 5-cyano-2,3-ditolylklorid (CTC) till ett färgämne som visar en röd fluorescens. Därför, när CTC-färgade kulturer avger dessa fluorescenser, indikerar det närvaron av livskraftiga bakterier. Propidiumjodid är en fläck som endast verkar på icke-levande celler som har skadade membran och är därför användbar för att identifiera döda bakterieceller.
Identifiering av cellulära strukturer
Färgning ger en metod för tydlig visualisering av olika cellstrukturer. Till exempel tillåter Feulgen-färgningsmetoden identifiering av kärnan i bakterieceller, medan Albert-färgning är användbar för att visualisera metakromatiska granuler. På samma sätt möjliggör silverimpregneringstekniken identifiering av spiroketer. Flagella är lätta att observera när de färgas med Ryus färg. Malakitgrön färgning hjälper till att identifiera bakteriesporer.
